HepG2细胞培养攻略

HepG2 细胞是来源于一个15岁白人的肝癌组织；分泌多种血浆蛋白：清蛋白、α2-巨球蛋白、血纤维蛋白溶酶原、转铁蛋白等；模式染色体数为55；该细胞在免疫抑制小鼠中不致瘤；是一个合适的转染宿主；表达标志物包括胰岛素受体；胰岛素样生长因子 II （IGF II）受体。呈上皮样；贴壁，传代比例 1:4 - 1:6；营养体系是MEM+10% FBS。

名称

HepG2（人肝癌细胞）

形态

上皮样

生长特性

贴壁；传代比例 1:4 - 1:6

营养体系

MEM（abs9503）+10% FBS（abs972）+1% PS（abs9244）

图1 HepG2 人肝癌细胞

首先我们讨论的是HepG2长得怎么才算好呢？相比于其它细胞，HepG2长得相对ugly一些，这个细胞状态好的形态学表现有哪些？我们来看一组对比（图3和图4）。

差的细胞特点：细胞裂解，背景脏；

好的细胞特点：细胞克隆成岛状，背景干净，对比是很鲜明的。

接下来我们讨论一下HepG2细胞消化问题。在体外培养时，该细胞容易聚团呈岛状（如图4所示），且如果长得过满，轻度消化就成片下来，容易成团。

图4 HepG2细胞聚团增殖成呈岛状分布

传代时，怎样才能使HepG2消化成单个细胞？

有两种解决办法：

※ 融合率达到80%即可传代，长太满容易成片脱落；

※ 先用胰酶消化约3分钟，用完培终止消化作用，然后用移液管将细胞悬液吸起，将管口稍微用力按在培养瓶底部，用力快速将细胞悬液挤出（可重复一次），可有效减轻细胞聚团。

HepG2是最为常用肝癌细胞系之一，主要用于肝脏研究。

肝炎病毒研究：HepG2是常用的研究HBV和HCV细胞系模型，利用CRISPR/Cas9构建基因敲除HepG2的HBV感染细胞模型细胞，为彻底治愈乙肝提供新思路。体外肝癌（HCC）模型：HepG2中p53抑癌基因无突变，因此可用于研究p53与肝细胞癌（HCC）的密切关系，以及HCC的发病、诊治、预防。

药物研究：肝脏是人体内药物代谢的最主要器官，也是重要的解毒器官。HepG2细胞系无论在形态上还是功能上都更接近于人的肝组织，该细胞系常用于药物代谢和肝毒性研究。

本期讲解就到这里了，下一期您想了解哪种细胞的培养攻略呢？欢迎留言评论哦。如有细胞培养问题，欢迎扫码加入我们微信群哦。

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