碱裂解法提质粒

基因克隆中质粒DNA的小量制备？
A9：常见的质粒DNA提取方法有简易一步提取法、碱裂解法和煮沸法。最常用的为碱裂解法，原理是：在pH 12.0-12.6碱性环境中，线性的大分子量细菌染色体DNA变性，而共价闭环质粒（CC）DNA仍为自然状态。将pH值调至中性并有高盐浓度存在的条件下，染色体DNA之间交联形成不溶性网状结构。大部分染色体DNA和蛋白质在去污剂SDS的作用下形成沉淀，而质粒DNA仍为可溶状态。通过离心，将可去除大部分细胞碎片、染色体DNA、RNA及蛋白质，质粒DNA尚在上清中，再用乙醇沉淀回收质粒DNA。目前，SunShineBio的商品化质粒小量提取试剂盒可以帮助您回收高质量、高效率的质粒。