LLC(小鼠肺癌细胞)培养教程

细胞名称：LLC(小鼠肺癌细胞)

细胞别称：LL/2 (LLC1); LL/2 (LLc1); LL/2(LLc1); LL/2; LL2; LLC1; LLC; Lewis lung carcinoma line 1; Lewis lung carcinoma; Lewis-Lung; Lewis Lung

细胞货号：SNL-119

生长特性：贴壁

培养条件：DMEM+10% FBS+1% P/S

培养环境：空气，95%；二氧化碳 (CO2)，5%；37℃

细胞简介：LLC细胞是一种从C57BL小鼠的肺中建立的细胞系，该小鼠携带由原发性Lewis肝癌植入引起的肿瘤。LLC细胞对1, 3-双-（2-氯乙基）-1-亚硝基脲有抗性，但对甲氨蝶呤敏感。据报道，LLC细胞具有高度致瘤性，可以在C57BL小鼠成瘤，但在小鼠中转移性较弱。LLC细胞在培养瓶中形成多层，但实际上没有融合。LLC细胞鼠痘病毒阴性，被广泛用作转移模型，并有助于研究癌症化疗药物的机制。

  

🔺 细胞正常生长形态照片

LLC细胞培养注意事项

 🔹 1.形态多样

LLC细胞形态不均一，上皮样细胞与圆形细胞同时存在，比例不定，两种形态的细胞皆为贴壁状态。可能存在少量漂浮细胞，当贴壁细胞较多时，漂浮细胞可以舍弃。当漂浮细胞较多时，可在换液时离心收集并接种回原瓶。

🔹 2.细胞生长较快

培养时应加入足量的培养基，避免培养基营养快速耗尽导致细胞脱落或状态变差。注意关注培养基颜色变化和细胞密度，培养基变黄后及时换液，细胞密度到达80%后及时传代。

🔹 3.密度较高时易堆叠生长

注意控制细胞密度不要过高，长期高密度培养易导致细胞堆叠生长或细胞聚团。

🔹  4.对血清要求高

LLC细胞对血清质量较为敏感，需要使用高质量胎牛血清进行培养。若培养中途更换血清品牌，细胞需要经历一个过渡期。（若需更换血清品牌，建议先使用厂家配套的完全培养基进行培养并保种，再更换新品牌血清配制的培养基进行测试培养，避免细胞因不适应新血清而损失细胞）

🔹  5.细胞贴壁较弱

该细胞贴壁比较弱，消化时间偏短，注意控制消化时间（消化步骤见下文传代攻略）。

另外，在遇到快递运输震荡、低温、室温静置太长时间、添加的培养基或其他试剂过冷等情况时会出现明显的细胞回缩变粗变短甚至脱落的现象，及时放回培养箱静置培养后可恢复正常。

平时注意传代换液前将培养基、PBS等试剂充分预热，不要把细胞放在室温下太长时间。采用T25瓶发货，收货时可能出现部分细胞漂浮，正确处理后细胞可正常生长（处理方法见下文收货攻略）