图解流式 | 第2期.基于散射光通道去除细胞碎片

上周，我们的图解流式“开解”啦！我们分享了“流式通道”中的散射光通道FSC与SSC的原理。即FSC代表细胞大小；SSC代表细胞的颗粒度，那动动我们的小脑袋。理论上，不同细胞群的FSC值和SSC值应该最多相差几倍（毕竟都是细胞，一般也相差不到哪去

）

但在实际流式上机过程中，就会出现上图所示FSC/SSC显著差异的不同分群，为什么会这样呢？它们又分别代表什么含义？让我们来一探究竟~

（如上图所示）流式分析的原理是在一定气体压力下，用鞘液（一种不含细胞或微粒的缓冲液）将细胞悬液压入流动室，形成一个圆形的流束（即鞘流），能够使得待测细胞在鞘液的包裹下单行排列（挨个通过），由流动室的喷嘴喷出，形成细胞柱，依次通过流式细胞仪的检测区域（如上图所示）。

那在实验操作过程中，细胞可能会损伤破裂，也可能聚集，那也就是说，挨个通过流式仪的可能是细胞碎片，有可能是单个细胞，也有可能是两到多个细胞黏附一起形成的多聚体细胞，显然这三类的形态及颗粒度就相差较大，而我们只想要分析单细胞的不同特征，所以必须将细胞碎片和多聚体细胞排除。

今天我们先来学习如何去除细胞碎片~

回到流式图：左边FSC-low区域更可能是细胞碎片，右边区域则更有可能包含我们感兴趣的细胞群体。

这就完成了圈门工作的第一步——去除细胞碎片。

那多聚体细胞又要怎么去除呢，我们下期再见！

写在最后

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