一种植物开放式组织培养育苗的方法

专利名称：一种植物开放式组织培养育苗的方法
技术领域：
本发明属于生物技术领域中的植物组织培养技术，具体涉及到一种植物开放式组织培养育苗的方法。
背景技术：
植物组织培养是本世纪初开始，以植物生理学为基础发展起来的一项植物繁殖技术。经过近一个世纪的发展，植物组培技术以其独特的优势，已在科学研究和生产上得到广泛应用，发展至今，它的理论研究已相当精深。植物组织培养技术是一项技术性很强的工作、技术易传性差，基础设施投入大，无菌条件要求高，炼苗周期长，该技术很难普及推广应用。同时，它的技术环节还存在不少问题。传统组培过程繁杂的技术环节，都是围绕防止污染而制定的，控制污染成了组培中的首要技术，不能把污染率降低到可以接受的范围，也就意味着这项工艺不能进行下去。而影响污染的因素多种多样，因此，使得污染问题十分复杂，也很难防治，成为限制组培产业化的重要原因之一。“植物开放式组织培养”是一项可以在自然、有菌环境中，接种、培养各类植物组织的高新技术。它是针对目前广泛使用的、必须在密闭无菌环境下，接种、培养植物组织的组织培养而设计、发明的。开放式组织培养可使植物组织培养育苗过程脱离严格无菌的操作环境，在开放的有菌环境中进行植物组织培养育苗，这从根本上简化了植物组织培养育苗环节，提高了工作效率，大大降低了育苗成本。申请号为20041002 4035.5的“一种非无菌条件下的植物组织培养方法”，该技术主要是在培养基里添加消毒杀菌剂，制备抑菌培养基，在非无菌自然环境下接种，并按常规进行管理培养。该技术省略了消毒灭菌设备、工具、材料以及繁琐的操作环节，从而形成一种简单、易行、投资少而且在非无菌自然环境下和条件下的植物组织培养方法。但该技术所述的杀菌剂是以化学试剂为主，配方中组成起来的杀菌剂种类繁多，生产成本也会由此而提高，抑菌剂配制也相对很繁琐。申请号为200910060484.8的“一种开放式植物组织培养育苗方法”，该技术是在培养基中添加的抑菌剂是以植物提取物为主。以植物为原料提取抑菌剂，生产成本确实很低，但从该工艺体现出的植物提取物的制备工艺却很复杂，而且需要昂贵的设施设备才能实现植物提取抑菌剂的制备，这样的工艺仅限于有一定经济实力的企业、科研单位才能运作，很难普及推广应用。

发明内容
本发明的目的是克服上述技术的不足而提供一种植物开放式组织培养育苗的方法。主要体现于:本发明的配方中主要凯松为主，成分组成简单，原料易找且使用成本低廉；抑菌剂配制过程工艺简单。利用常规培养基中添加抑菌剂制备成抑菌培养基，用普通塑料杯作为培养容器，在非无菌自然环境下将植物组织接入抑菌培养基中，在自然环境条件下进行培养管理。组织培养育苗过程脱离严格无菌的操作环境，在开放的有菌环境中进行植物组织培养育苗，这从根本上简化了植物组织培养育苗环节。凯松是英文KATONH的音译，有效成分是异噻唑啉酮CIT和MIT的混合物。CAS:26172-55-4，2682-20-4 ;分子式:C4H4C1N0S+C4H5N0S ;分子量:149.56+115.06。凯松杀菌广谱高效、无毒、持效性长，能有效的抑制和灭除菌类和各种微生物；凯松安全方便，性质稳定，加入量少，在PH值3-9.5的范围内均适用；凯松绿色环保，对环境友好，不含甲醛重金属等有害物质。本发明是通过以下技术方案来实现的:1、一种植物开放式组织培养育苗的方法，是通过制备抑菌剂，利用常规培养基中添加抑菌剂制备成抑菌培养基，用普通塑料杯作为培养容器，在非无菌自然环境下将植物组织接入抑菌培养基中，在自然环境条件下进行培养管理。2、一种植物开放式组织培养育苗的方法，其抑菌剂母液配制使用的原料是:(I)凯松(异噻唑啉酮)。(2)氯化镁。(3)硝酸镁。(4)山梨酸钾。 (5)苯钾酸钠。(6)蒸馏水。3、一种植物开放式组织培养育苗的方法，其抑菌剂母液配制方法如下:(I)原料配比:凯松(异噻唑啉酮)3克、氯化镁23克、硝酸镁23克、山梨酸钾20克、苯钾酸钠20克、蒸馏水1000ml。(2)母液配制:先用200ml蒸馏水稀释凯松，再用400ml蒸馏水稀释氯化镁、硝酸镁，接着用400ml蒸馏水稀释山梨酸钾、苯钾酸钠，最后将上述液体混合起来即制备成母液，并装瓶避光保存。4、一种植物开放式组织培养育苗的方法，其是用透明无毒的普通塑料杯作为培养容器。5、一种植物开放式组织培养育苗的方法，其抑菌培养基的配制方法如下:(I)按常规培配制培养基质，并根据各种植物培养所需添加无机盐、糖、激素。(2)每IOOOml的培养基中添加抑菌剂母液按50 90ml。(3)上述混合液配制好后，每IOOOml混合液添加20克琼脂，并将其加热至琼脂完全溶解后，分装到无毒的普通塑料杯作为培养容器。6、一种植物开放式组织培养育苗的方法，其接种方法如下:(I)按常规采取植物组织。(2)在非无菌自然环境下将植物组织接入装有抑菌培养基培养容器中。(3)用保鲜膜将培养容器口封住。7、一种植物开放式组织培养育苗的方法，其接入植物组织种的培养容放置在自然环境条件下进行培养管理。本发明既有如下优点:1、本发明配方中成分组成简单，原料易找且使用成本低廉；抑菌剂配制过程工艺简单，但应用效果显著。2、本发明无需高压灭菌、无菌接种和无菌培养，昂贵的高压灭菌锅和超净工作台被省去。3、本发明用普通塑料杯作为培养容器，更换了操作困难、易损的玻璃器皿。4、本发明是在非无菌自然环境下将植物组织接入抑菌培养基中，在自然环境条件下进行培养管理，省略了照价昂贵的接种室、培养室。5、本发明是在自然有菌环境接种、自然阳光培养环境，组培苗生长势强，常见的玻璃化、褐化、黄化等影响正常生长问题大为缓解；组培苗向商品苗过度期的炼苗、缓苗时间短，成活率高达95%以上。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明的方法进一步说明。1、一种植物开放式组织培养育苗的方法，是通过制备抑菌剂，利用常规培养基中添加抑菌剂制备成抑菌培养基，用普通塑料杯作为培养容器，在非无菌自然环境下将植物组织接入抑菌培养基 中，在自然环境条件下进行培养管理。2、一种植物开放式组织培养育苗的方法，其抑菌剂母液配制使用的原料是:(I)凯松(异噻唑啉酮)。(2)氯化镁。(3)硝酸镁。(4)山梨酸钾。(5)苯钾酸钠。(6)蒸馏水。3、一种植物开放式组织培养育苗的方法，其抑菌剂母液配制方法如下:(I)原料配比:凯松(异噻唑啉酮)3克、氯化镁23克、硝酸镁23克、山梨酸钾20克、苯钾酸钠20克、蒸馏水1000ml。(2)母液配制:先用200ml蒸馏水稀释凯松，再用400ml蒸馏水稀释氯化镁、硝酸镁，接着用400ml蒸馏水稀释山梨酸钾、苯钾酸钠，最后将上述液体混合起来即制备成母液，并装瓶避光保存。4、一种植物开放式组织培养育苗的方法，其是用透明无毒的普通塑料杯作为培养容器。5、一种植物开放式组织培养育苗的方法，其抑菌培养基的配制方法如下:(I)按常规培配制培养基质，并根据各种植物培养所需添加无机盐、糖、激素。(2)每IOOOml的培养基中添加抑菌剂母液按50 90ml。(3)上述混合液配制好后，每IOOOml混合液添加20克琼脂，并将其加热至琼脂完全溶解后，分装到无毒的普通塑料杯作为培养容器。6、一种植物开放式组织培养育苗的方法，其接种方法如下:(I)按常规采取植物组织。(2)在非无菌自然环境下将植物组织接入装有抑菌培养基培养容器中。(3)用保鲜膜将培养容器口封住。
7、一种植物开放式组织培养育苗的方法，其接入植物组织种的培养容放置在自然环境条件下进行培 养管理。
权利要求
1.一种植物开放式组织培养育苗的方法，其特征是该方法是通过制备抑菌剂，利用常规培养基中添加抑菌剂制备成抑菌培养基，用普通塑料杯作为培养容器，在非无菌自然环境下将植物组织接入抑菌培养基中，在自然环境条件下进行培养管理。
2.根据权利要求书I所述的一种植物开放式组织培养育苗的方法，其特征是抑菌剂母液配制使用的原料是: (1)凯松(异噻唑啉酮)。
(2)氯化镁。
(3)硝酸镁。
(4)山梨酸钾。
(5)苯钾酸钠。
(6)蒸馏水。
3.根据权利要求书I所述的一种植物开放式组织培养育苗的方法，其特征是抑菌剂母液配制方法如下: (1)原料配比:凯松(异噻唑啉酮)3克、氯化镁23克、硝酸镁23克、山梨酸钾20克、苯钾酸钠20克、蒸馏水1000ml。
(2)母液配制:先用200ml蒸馏水稀释凯松，再用400ml蒸馏水稀释氯化镁、硝酸镁，接着用400ml蒸馏水稀释山梨酸钾、苯钾酸钠，最后将上述液体混合起来即制备成母液，并装瓶避光保存。
4.根据权利要求书I所述的一种植物开放式组织培养育苗的方法，其特征是用透明无毒的普通塑料杯作为培养容器。
5.根据权利要求书I所述的一种植物开放式组织培养育苗的方法，其特征是抑菌培养基的配制方法如下: (1)按常规培配制培养基质，并根据各种植物培养所需添加无机盐、糖、激素； (2)每IOOOml的培养基中添加抑菌剂母液按50 90ml。
(3)上述混合液配制好后，每1000ml混合液添加20克琼脂，并将其加热至琼脂完全溶解后，分装到无毒的普通塑料杯作为培养容器。
6.根据权利要求书I所述的一种植物开放式组织培养育苗的方法，其特征是接种方法如下: (1)按常规采取植物组织。
(2)在非无菌自然环境下将植物组织接入装有抑菌培养基培养容器中。
(3)用保鲜膜将培养容器口封住。
7.根据权利要求书I所述的一种植物开放式组织培养育苗的方法，其特征是接入植物组织种的培养容放置在自然环境条件下进行培养管理。
全文摘要
本发明属于生物技术领域中的植物组织培养技术，具体涉及到一种植物开放式组织培养育苗的方法。具体步骤是通过制备抑菌剂，利用常规培养基中添加抑菌剂制备成抑菌培养基，用普通塑料杯作为培养容器，在非无菌自然环境下将植物组织接入抑菌培养基中，在自然环境条件下进行培养管理。本发明的配方中成分组成简单，原料易找且使用成本低廉；抑菌剂配制过程工艺简单，但应用效果显著。组织培养育苗过程脱离严格无菌的操作环境，在开放的有菌环境中进行植物组织培养育苗，这从根本上简化了植物组织培养育苗环节。
文档编号A01H4/00GK103155861SQ20111041030
公开日2013年6月19日 申请日期2011年12月10日 优先权日2011年12月10日
发明者何寒 申请人:何寒