（文献周分享)中国草莓炭疽病菌的分离鉴定及其对多菌灵的敏感性

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本文作者：杨晓琦

导读

大家好，今天给大家分享的是2021年1月中国农业大学张国珍教授课题组和西北农林大学刘西莉教授课题组发表在Plant Disease上的一篇文章。

由Colletotrichum炭疽菌引起的草莓炭疽病是一种重要的病害，可造成重大的经济损失。结合多基因联合建树分析和形态学鉴定，从中国9个省市采集的草莓炭疽病样品中共分离到64个菌株，鉴定为3种：Colletotrichum fructicola果生炭疽菌( 29株)、Colletotrichum siamense暹罗炭疽菌( 23株)和Colletotrichum nymphaeae睡莲炭疽菌( 12株)。C. siamense对果实和叶片致病力较强，C. fructicola对树冠致病力较强，C. nymphaeae对果实、叶片或树冠的致病力较弱或不致病。选择75株分离菌株进行多菌灵的敏感性测定，其中11株为以前保存。C. siamense包括2株高抗菌株( HR )，21株中抗菌株( MR )；C. fructicola 包括9株敏感菌株( S )，24株HR，以及4株MR；C. nymphaeae的15株供试菌株均不敏感，在500mg/mL多菌灵处理的PDA培养基上生长未被完全抑制。本研究揭示了C.  fructicola是引起草莓炭疽病的优势种，进一步提高我国草莓炭疽病菌对杀菌剂抗性治理的认识水平。

主要内容

1. 草莓炭疽病菌的分离及形态学特征

根据PDA上的菌落和分生孢子形态，将所有菌株分为三组（图1）。I组和II组分别有29株和23株（图1 a-l）；末端为圆柱形分生孢子被划分为胶孢炭疽菌复合种(C. gloeosporioides complex)。III组包含12株产生梭状分生孢子（图1 m-q），属于尖孢炭疽菌复合种(C. acutatum complex)。

2. 系统发育分析

使用贝叶斯法对分离所得草莓炭疽病菌进行多基因联合建树分析，分子标记分别为：ACT、CAL、CHS-1、GAPDH、ITS和TUB2（图2）；ITS、GAPDH、CHS-1、HIS3、ACT和TUB2（图3）。C. fructicola果生炭疽菌( 29株)和C. siamense暹罗炭疽菌( 23株)属于胶孢炭疽菌复合种；C. nymphaeae睡莲炭疽菌( 12株)属于尖孢炭疽菌复合种。

 

        

3. 致病性试验

供试菌株对草莓果实、叶和冠均具有致病性，接种3种分离菌株3天后出现了不同程度的症状。

4. 草莓炭疽病菌对多菌灵的敏感性

23株C . siamense中，HR为8.7 % ( 2株)，MR为91.3 % ( 21株)；37株C . fructicola中，S为24.3 % ( 9株)，MR为10.8 % ( 4株)，HR为64.9 % ( 24株)。15株C. nymphaeae中，100 %为IS对多菌灵(表3 )

5. 敏感/抗性菌株TUB2基因的分析

对代表性分离菌株进行β-tubulin ( TUB2 )扩增和测序，发现C. siamense和C. fructicola的HR菌株在198位密码子发生点突变，编码的氨基酸由谷氨酸突变为丙氨酸。C. siamense和C. fructicola的MR菌株在200位密码子发生点突变，编码的氨基酸由苯丙氨酸突变为酪氨酸。在TUB2基50、167、198、200和240位密码子上未检测到点突变。

总结

化学药剂防治草莓炭疽病是必要的。研究表明，不同草莓部位的C. siamense和C. fructicola对多菌灵表现出较高的抗性，C. nymphaeae对多菌灵不敏感。这一发现表明多菌灵是草莓炭疽病的无效处理，在实际生产中不推荐用于防治草莓炭疽病。