斑秃患者血液NKG2D CD4 T 细胞水平升高

Yong Hyun Jang, MD, PhD, Jin Kyeong Choi, PhD, Yun HwanJang, MD,  Sun Young Moon, MD, Weon Ju Lee, MD, PhD, Seok-JongLee, MD, PhD,  Young-Ae Choi,PhD, Sang-Hyun Kim, PhD, and Do Won Kim, MD, PhD

Departmentsof Dermatology  and Pharmacology, School of Medicine, Kyungpook National University, Daegu, Korea,and the Molecular Immunology Section,  Laboratory  of  Immunology,National Eye Institute, National Institutes of Health, Bethesda, Maryland

主题负责人：郝飞；   审校：  陈宏翔；     翻译：许凤妮

致编辑：自然杀伤细胞活化性受体（NKG2D）不仅是斑秃（AA）、也是其它许多自身免疫病的关键靶点。AA是一个Th1介导，由干扰素γ（IFN-γ）及其诱导产生的细胞因子激发的疾病¹。包括NK、NKT和CD8⁺T细胞在内的NKG2D⁺细胞以及NKG2D活化的级联反应在AA的发病机制中发挥至关重要的作用。活化的NKG2D⁺细胞过度分泌IFN-γ，导致毛囊免疫赦免崩溃²。众所周知，AA皮损组织中毛球周围CD4⁺T细胞高度浸润，被称为“蜂群征”³。然而NKG2D⁺CD4⁺T细胞在AA中的绝大部分职能和表达模式仍未可知。本研究中，我们探讨了AA患者血液中NKG2D⁺CD4⁺T细胞水平的变化。

本研究纳入43名（男18名，女25名）AA患者和26名（男10名，女16名）个人史和体格检查中均无头皮损害的健康对照。应用流式细胞仪（FACS Aria;BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ）分析外周血单核细胞表面表达的NKG2D。各组结果以表达NKG2D的CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞或CD56⁺NK细胞的百分率表示。我们采集4次血样，对应进行4次FACS分析。因此，最终的数据以表达NKG2D的每种细胞相对于健康对照（设定为1）的倍数变化表示。根据AA严重程度、活动性、分型和治疗方案的差异将患者分为2到3个亚组，以便进行亚组分析。应用Mann-WhitneyU检验和Kruskal-Wallis检验进行统计分析。还对两个具有代表性的病例进行新鲜冰冻标本的双标记免疫荧光显微镜检查。

结果表明，与对照组相比，AA组NKG2D⁺CD8⁺T细胞和NKG2D⁺CD56⁺NK细胞的水平显著升高（p＜0.05）。有趣的是，AA患者外周血中表达NKG2D的CD4⁺T细胞亚群比健康对照的高2.49倍（p＜0.05；图1）。虽然没有显著统计学差异，但轻度AA和系统使用免疫抑制剂的患者NKG2D⁺CD4⁺T细胞的比例较低，。双标记免疫荧光显示了AA皮损中毛囊周围NKG2D⁺细胞共表达CD4（图2）。

最近，其它慢性自身免疫病（例如克罗恩病和类风湿关节炎）强调了NKG2D⁺CD4⁺T细胞的作用⁴。克罗恩病患者肠道固有层表达NKG2D的CD4⁺T细胞亚群水平显著升高⁵。这些NKG2D⁺CD4⁺T细胞克隆通过主要组织相容性复合体I类分子相关基因A（MICA）和NKG2D相互作用进行功能活化，产生IFN-γ并杀伤表达MICA的靶细胞⁵。我们猜测AA患者中NKG2D⁺CD4⁺T细胞可能具有Th1细胞因子的部分功能。我们的研究结果表明，产生IFN-γ的NKG2D⁺CD4⁺T细胞有成为AA治疗靶点和疾病活动性生物标志物的潜力,然而仍需要更多的研究探讨AA患者中NKG2D⁺CD4⁺T细胞的功能特性。

Drs Jang和J. K. Choi均对本研究做出了贡献。

筹资渠道：本研究由韩国国家研究基金会的基础科学研究计划支持，教育部提供资金（NRF-2015R1D1A3A01016229和2014R1A5A2009242），并经庆北国立大学医院的机构审查委员会批准（KNUH2014-03-003）。

利益冲突：无申明。

参考文献

1. Gilhar A, Etzioni A, Paus R. Alopecia areata. N Engl J Med.2012;366:1515-1525.

2. Paus R, Bertolini M. The role of hair follicle immuneprivilege collapse in alopecia areata: status and perspectives. J InvestigDermatol Symp Proc. 2013;16:S25-S27.

3. Ito T, Ito N, Saatoff M, et al. Maintenance of hair follicleimmune privilege is linked to prevention of NK cell attack. J Invest Dermatol.2008;128:1196-1206.

4. Killock D. Experimental arthritis: NKG2D: a potentialtherapeutic target in RA? Nat Rev Rheumatol. 2011;7:438.

5. Allez M, Tieng V, Nakazawa A, et al. CD41NKG2D1 T cells inCrohn’s disease mediate inflammatory and cytotoxic responses through MICAinteractions. Gastroenterology. 2007;132:2346-2358.

http://dx.doi.org/10.1016/j.jaad.2016.07.056