人 类 白 细 胞 抗 原（human leukocyte antigen，HLA）分子：表达于我们体内几乎所有的有核细胞表面，控制识别“自身”和“异己”的生物学过程，它的主要功能是当作载体将异体抗原递交给 T 淋巴细胞，从而启动特异且适当的免疫反应将异体成分排除。临床上：影响器官移植生存期的主要免疫障碍。如果受体和供体的 HLA 不匹配，它们之间将引发细胞和抗体介导的排斥反应。
HLA是人类的主要组织相容性复合体（MHC）的表达产物，位于6号染色体短臂6p21.3上长度约4.0M的区域内，包含超过200个基因。
HLA根据不同的基因位点分为三大类型：Ⅰ型，Ⅱ型和Ⅲ型，因序列上高度可变，导致HLA等位基因数量异常庞大（如图1所示）。
图1，图片来源于网络，侵删
HLA-Ⅰ类：包括HLA-A、HLA-B和HLA-C等，分布于几乎所有有核细胞表面， 以淋巴细胞表面密度最大。
HLA-I类（MHC I）和II类（MHC II）基因是编码结合和呈递抗原的分子，使细胞毒性T淋巴细胞经抗原结合槽与成熟的HLA细胞表面蛋白结合。
I类基因主要将抗原呈递给CD8+ T细胞；II类基因主要将抗原呈递给CD4+ T细胞（如图2所示）。
HLA-Ⅱ类：因包括HLA-D家族，主要有HLA-DP、HLA-DQ和HLA-DR等，主要分布于B淋巴细胞、巨噬细胞和树突状细胞等专职抗原提呈细胞表面。
HLA-Ⅲ类：大约包含75个基因，大多数功能不明。
图2，图片来源于网络，侵删
T细胞受体（TCR）在识别APC细胞或者靶细胞上的MHC分子所提呈的抗原肽时，不仅识别抗原肽，还要识别与抗原肽结合的MHC分子类型（如图3所示）。
HLA-I：是细胞膜糖蛋白，由一条（重链）α链和一条（轻链）β2微球蛋白组成， 重链分为胞浆区，跨膜区，胞外活性区（免疫球蛋白样区，肽结合区）。
HLA-II：是膜糖蛋白，由一条α多肽链和一条β多肽链组成。
图3，图片来源于网络，侵删
HLA 基因分型查询数据库
网址：https://www.ebi.ac.uk/ipd/imgt/hla/
IPD-IMGT/HLA数据库是一个专门提供人类主要组织相容性复合体(MHC)，包括WHO序列命名法委员会命名的HLA系统等位基因信息，是国际免疫遗传学项目(IMGT)的一部分。截至目前，有33490种不同的HLA等位基因。
IPD-IMGT/HLA数据库官网
HLA的命名
按照世界卫生组织HLA系统命名委员会2010年公布的等位基因命名原则，一个完整的HLA等位基因由8个数字和1个字母组成。
HLA命名原则
HLA-:前缀
A:基因名称
*：分隔符
02：等位基因组，常指血清学特异性
：字段分隔符
101：特定HLA蛋白质
01：编码基因内显示同义的DNA替换
02：非编码区与的差异
N:后缀，用来表示基因表达的变化
HLA 基因分型检测方法
（1）聚合酶链反应-序列特异性引物（polymerase chain reaction-sequence specific primer， PCR-SSP）方法
（2）聚合酶链反应-序列特异性寡核苷酸杂交（ polymerase chain reaction-sequence specific oligonucleotide， PCR-SSO） 方法
（3）基于直接测序法（sequence-based typing, SBT）
PCR-SSP法
基本原理：
根据HLA基因序列的多态性， 设计一系列等位基因特异性引物， 通过特定的PCR反应体系扩增各等位基因的特异性DNA片段， 产生相对应的特异性扩增产物条带， 然后通过琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增产物，根据是否得到PCR产物以及产物的片段大小进行HLA基因分型。
检测方法的局限性：
基于已知序列信息的分型方法可能检测不到新的等位基因， 或者无法与已知等位基因相区别，为避免漏检新的等位基因，当使用PCR-SSP方法时，可采用多种引物， 以提高检测到新等位基因的可能性。
PCR-SSO法
基本原理：
首先是对HLA的多态性区域进行扩增， 然后根据碱基配对原则使用特异性探针进行杂交，根据杂交信号判断结果。 基于PCR-SSO技术的HLA分型方法主要包括正相SSO方法和反相SSO方法两种，具有灵敏度高、 特异性强、 加样量少的特点。
基于流式荧光检测仪Luminex平台的PCR-SSO基因分型检测系统，利用传统PCR-SSO的原理，首先对样本的HLA多态性区域进行扩增，扩增产物经解链后与包被在微珠上的特异性探针杂交结合， 通过Luminex流式荧光检测仪检测， 确定HLA分型结果，整合了荧光编码微珠、 激光检测、 应用流体力学、 高速数字信号和计算机运算法等多项技术的高通量检测平台。
检测方法的局限性：
基于已知序列信息的分型方法可能检测不到新的等位基因， 或者无法与已知等位基因相区别，为避免漏检新的等位基因，可以加大探针的种类和数量， 以提高检测到潜在的新的等位基因的可能性。
SBT法
基本原理：
基于SBT的HLA基因分型检测是对DNA序列进行直接测序， 通过与国际HLA数据库比对分析， 获得HLA等位基因型别的分析方法。 任何DNA直接序列测定的方法均可用于HLA基因分型检测，该方法是最可靠的HLA基因分型方法， 可准确确定新的HLA等位基因。
检测方法的局限性：
由于HLA具有高度多态性， 在分型时测序区域有时会出现序列组合形式上完全相同的情况，这种情况既可能是由于两个或多个等位基因在所检测区域序列一致（ 两者差异在所检测区域之外），又可能是由于该测序区域存在相同的等位基因组合， 此时应扩大检测区域或采用等位基因选择性扩增的方法进行分型。
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