hGITR/Foxp3小鼠模型介绍

通过hGITR与Foxp3-IRES-mRFP（FIR）小鼠交配建立的GITR/Foxp3小鼠模型。FIR的双谱报告基因（bicistronic reporter）表达了一种红色荧光蛋白（RFP），敲入内源性Foxp3位点，能反映Foxp3的表达。

品系背景：C57BL/6J×C57BL/6N

品系说明：

■ GITR的胞外域完全人源化。

■ 人GITR在小鼠体内表达具有正常的生理表达和调节模式。

■ 小鼠的免疫系统功能健全。

■ 缺乏小鼠GITR的表达，从而避免交叉反应。

■ mRFP报告基因忠实地反映了Foxp3的表达。

■ 内源性Foxp3的表达不受插入基因的影响。

模型验证：

图1. hGITR/Foxp3小鼠的hGITR表达模式与mGITR在野生型小鼠中的表达模式一致。被αCD3/αCD28刺激的野生型和hGITR/Foxp3小鼠脾脏细胞中的Treg细胞和经典CD4+T细胞上分别表达鼠源GITR和人源GITR。

 

图2. RFP表达能够反映Foxp3的表达。mRFP在hGITR/Foxp3小鼠非通透性（A）或通透性（B）新鲜分离脾细胞（CD3+CD4+）上的表达。对mRFP+细胞进行分选和渗透，以检测Foxp3 (C)。

 

图3. 保留了Treg细胞对免疫功能的抑制性调控作用。分离效应T细胞（CD4+CD25-）并用CTV进行标记，在抗原呈递细胞培养的环境中，将效应T细胞与不同浓度的RFP+Treg细胞用丝裂霉素和αCD3处理四天时间。采用流式细胞术（CTV+细胞）检测Treg细胞的增殖情况。

图4. 在人源化GITR小鼠体内，hGITR单抗的处理能够发挥抗肿瘤的作用。hGITR纯合子小鼠种植MB49膀胱癌细胞，在αhGITR抗体的处理下肿瘤生长受到抑制。