分子病理学技术之荧光原位杂交 分子病理学是病理学的一个重要分支，其在疾病的诊断、靶向治疗及预后预测等方面的作用日益凸显。

分子病理学技术主要包括三大类：

1.荧光原位杂交（Fluorescence in situ hybridization, FISH)；

2.测序技术（包括Sanger测序、二代测序等）；

3.基于PCR的技术（包括PCR、RT-PCR、实时定量PCR及数字PCR等）。

虽然以上每一类技术都有其特定的检测特点及范围，但作为与病理形态学联系最为紧密的FISH技术，迄今为止，在淋巴瘤、白血病、乳腺癌、胃癌等疾病的临床应用中，依然无法替代。 FISH是一种基于核酸双链互补的原则，将荧光标记的核酸探针与细胞核内靶DNA进行杂交，通过荧光显微镜观察荧光信号来判断靶DNA数目和结构变化的技术。其基本原理是：核酸变性-退火-复性。 

该技术有很高的敏感性和特异性，可用于检测淋巴瘤、白血病及其它各种实体瘤细胞的染色体/基因数目和结构的变化，包括染色体易位、非整倍体变化，基因缺失、扩增等分子遗传学改变，为临床病理工作中疾病的诊断、分类、靶向治疗及预后预测提供准确的分子遗传学信息。 

对医院来说，FISH是分子检测领域技术和设备要求门槛最低的平台，只需一台杂交仪和一台荧光显微镜即可开展。不像PCR需要认证的实验室，也不像二代测序需要强大的数据分析能力。然而，'第三类体外诊断试剂管理条例'对于FISH探针的限定，曾经在一定程度上有碍这一技术的应用。 

近来，国家明文发布，对于非明确诊断意义或临床指导用药的体外诊断试剂，不再按第三类体外诊断试剂进行管理，这也就意味着许多FISH探针不再需要'第三类体外试剂'的报证即可在医院病理科应用，这对临床来说绝对是巨大的好消息！ 目前除了HER2 及ALK等少数探针外，绝大部分探针均无需'三类证'，这对于满足临床对FISH技术的迫切需求具有重大意义。 

分子病理诊断的高速发展也得益于国家的大力支持，从三、五年前无人知晓到现在的路人皆知，在国家的大力支持下，它必将为人民带来更大的福音。十九大也明确提出，分子（基因）检测将逐渐纳入医保范畴。 可以预见，不久的将来，FISH技术将会迎来一个巨大的发展空间，也会普及到全国各地的三级甚至二级医院！Are you ready ？ 那么问题来了，如果一个科室没有开展FISH检测，也没有FISH经验，又想开展这一检测，该怎么办呢？敬请期待下期内容！