汇总：结核病的相关检查，你知道多少？

来源：医学之声 作者：文哥

结核病相关实验室检查

一、结核分枝杆菌

特点：属于专性需氧菌，适宜生长温度为37℃。不易染色，但经品红加热染色后不能被酸性乙醇脱色，故称为抗酸杆菌。对营养要求高，细菌培养生长缓慢，需2-4周才可看见菌落。

分类：人结核分枝杆菌，牛结核分枝杆菌，非洲分枝杆菌，田鼠分枝杆菌。

飞沫传播：高声讲话、用力咳嗽、打喷嚏产生的飞沫直径小，最易传播；随地吐痰，痰液干燥后结核分枝杆菌随尘埃飞扬，也可吸入性感染，但并非主要传播方式。

病人污染物传播机会少；经皮肤伤口感染、消化道传播、经胎盘母婴传播极少见。可能是因为结核菌为需氧菌，无法在厌氧环境长期生存

潜伏结核感染：指无症状且不排菌的感染者，仅皮肤结合菌素试验或γ-干扰素释放试验阳性。

开放性肺结核：排菌，是结核传播的主要来源，暴露于结核菌环境或与结核患者近距离接触可传染。

卡介苗：利用人结核分枝杆菌与牛结核分枝杆菌的抗原交叉免疫原性提供免疫保护。

二、常用的实验室检查及临床意义

1.结核菌素试验（结核菌素纯蛋白衍生物PPD）

结核菌素是结核分枝杆菌的代谢产物，主要成分为结核分枝杆菌的分泌性蛋白

PPD皮内注射法：将PPD 5IU（0.1ml）注入左前臂内侧上中三分之一交界处皮内，形成局部皮丘。48-72h观察反应。

局部皮肤 硬结直径 （横+纵）/2 mm	结果	临床意义
＜5mm	阴性	提示未受结核菌感染，还可见于①感染在4到8周内机体变态反应尚未充分建立；②淋巴系统免疫缺陷；③营养不良、各种危重病人；④应用糖皮质激素、抗肿瘤药者和老年人。
5-9mm	一般阳性	存在对结核分枝杆菌的细胞免疫反应，提示存在结核感染的可能性大。
10-19mm	中度阳性
≥20mm，或水疱、破溃、坏死及淋巴管炎	强阳性	提示活动性结核可能
假阳性：PPD与卡介苗存在交叉反应，在接种过卡介苗的人群中虽无结核感染亦可出现PPD阳性。 假阴性：PPD可能因细胞免疫功能受损而出现假阴性，例如免疫缺陷患者HIV/AID。 PPD特异性差，且不能用于区分潜伏感染和活动性结核感染。

该患者PPD试验48h后，可以看见水疱，为强阳性，需进一步完善胸部CT检查，及其他结核相关检查，包括γ-干扰素释放试验、细菌培养、结核杆菌抗体、痰涂片、结核杆菌DNA测定等。

2.γ-干扰素释放试验

原理：以T细胞为基础，被结核分枝杆菌抗原刺激而致敏的T细胞，再次遇到同类抗原时能产生γ-干扰素，对分离的全血或单个核细胞在特异抗原刺激后产生的干扰素进行检测，可以反应是否存在结核感染。

特异性、敏感性均高于结核菌素试验，能更好的区分真性结核感染和卡介苗接种诱导的反应；但和PPD一样无法区分获得性结核病和潜伏结核感染，对潜伏感染转变为活动性结核的风险无法预测。

主要用于结核感染高危人群、免疫抑制人群的筛查。

3.检测结核特异性抗体：差异性大，敏感性低，WHO不推荐血清学独立用于结核诊断。对痰阴性肺结核及肺外结核的诊断结果可对现有诊断方法起补充作用。

4.痰涂片抗酸染色--确诊，特异性

方法：石炭酸复红的抗酸染色，金胺-罗丹明等荧光染料涂片镜检。

结核杆菌检查是确诊肺结核最特异性的方法，痰中找到结核菌是确诊肺结核的主要依据。在我国非典型分枝杆菌尚属少见，故痰涂片抗酸杆菌阳性，肺结核诊断基本即可成立。偶尔可出现涂片阳性而培养阴性，未治疗的患者痰菌培养的敏感性和特异性高于涂片检查，涂片阴性或诊断有疑问时培养结果尤为重要。不能辨别死菌活菌；敏感性低，通常需5000-10000条菌/ml才能够得到阳性结果。

此外，肺泡灌洗液、胸液、腹水、尿液、脑脊液、胃液、脓液、粪便等标本都可进行检验，

临床上痰结核菌涂片至少三次。

5.细菌培养--金标准

结核分支杆菌的培养是结核菌检测和药敏试验的金标准，鉴定死菌活菌的可靠方法。缺点是时间长，敏感性低，涂片阳性标本只有约80%培养阳性。

传统固体培养：罗氏培养需4-6周，耗时较长

液体培养系统：BACTEC、MGIT需1-3周，比固体培养更敏感、快速。

MGIT技术8天内可显示结果，自动化MGIT可进行药敏检测。

6.结核分枝杆菌药敏测定

结核分枝杆菌分离后立即进行药敏测定，对异烟肼和利福平的药敏结果来判定是否为MDR菌株，传统的方法需借助固体、液体培养基中培养出的细菌进行药敏测定。

分子药敏检测：对样品DNA提取，PCR扩增，对扩增产物进行耐药性分析。

7.分子生物学技术（PCR）--耐药检测

PCR技术扩增标本中微量的结核菌DNA，一般镜检检测到10⁴-10⁵条菌/ml，PCR技术可检出1-100fg结核菌DNA。

在结核分枝杆菌耐药检测方面独具优势。

但是DNA提取过程中技术原因可出现假阳性，PCR无法区别活菌和死菌，不能用于疗效评估、流行病学调查。