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上周我们分选的液流系统大家貌似不是很喜欢,可能字数太多,说的啰嗦,我们又不是工程师不需要知道那么多,今天我就我们需要知道的东西给大家总结下。
液流系统
流式细胞仪的液流系统分为鞘液流和样品流,两者在流动室汇合,但是根据层流的原理我们知道两者可以保持相对独立,但是如果流动室有气泡或者不干净可能会导致相互干扰,从而使机器状态不正常,另外对于鞘液的选择,一般如果你做分析你可以用双蒸水代替,如果你的实验要求很高,最好采用公司提供的鞘液,如果你是做分选,可以用等渗PBS代替。
光路系统
光信号包括散射光和荧光信号,是流式细胞仪最重要的部分,因此如果你要做好流式务必熟悉光路系统,要理解光路系统请理解一下几个名词:激光器,通道,FSC,SSC,长通滤片(这些滤片有一个共同的特征就是不能通过的光反射,长通表示大于该滤片的光通过简称LP),短通滤片(SP),带通滤片·(BP),BP 730+-30,表示700-760nm的波长可以通过。
检测分析系统
这个系统承担着将收集到的光信号转换为电信号的只能,即PMT,这个转换的倍数关系通过我们所谓的荧光的电压来调节。另外我们需要理解转换后的电子波有三个参数,A W H,即面积、宽度和高度,其实任何一个指标都能反映该电子波的长度,但是很明显A会更加准确,因此我们在流式图上看到FSC-A代表的FSC通道收集到的荧光的经PMT后转换的电子波的面积。
分选系统
一般的分选都会有专门的技术员操作,我们再次不深入展开,有兴趣的可以去找找网络资料。
本文编辑:泽熙,
参考资料:网络以及曹雪涛教授主编的《流式细胞原理》
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