不宁腿综合征的诊断标准是基于专家共识制定，只有满足以下几项基本标准才可以诊断。
1. 患者有一种想要移动腿的冲动，但并不总是伴有腿部的不适感；
2. 在休息或不活动的时期，例如躺着或坐着的时候，移动腿部和令人不快的感觉会出现或恶化；
3. 移动腿的冲动和任何伴随的不适感可以通过移动（如步行或伸展）而部分缓解或完全缓解；
4. 在休息或不活动期间，移动腿的冲动和任何伴随的不适感在夜间加重，或仅在夜间发生；
5. 上述症状并非仅仅通过另一种疾病或行为状况可以解释（如神经病、肌痛、静脉淤滞、腿部水肿、关节炎、腿部抽筋、位置不适或习惯性抖腿）。
当然不宁腿综合征家族史和对多巴胺能药物的治疗反应也可以帮助医生诊断不宁腿综合征。
需要注意的是有时不宁腿综合征会泛化，可能不仅表现在腿部，还会波及上肢、头部等。有人还会用睡眠中的不适来描述，比如表述为焦躁不安的睡眠，像坐飞机一样睡眠，睡眠抽搐。
但是需要注意的是，这些标准远远不够，有时我们还需要做一些额外的医学评估，去找到可能引起不宁腿综合征的继发原因。比如有没有肾功能的问题或者铁代谢异常。
肾功能下降会增加不宁腿综合征发生风险，除了尿常规之外，我们还有必要明确患者的肌酐水平和肾小球滤过率。有研究发现铁代谢与不宁腿综合征密切相关，而血清铁蛋白和细胞转铁蛋白受体是两个反应铁代谢的指标，而且非常敏感。普遍的观点认为血清铁蛋白浓度低于50 ng/ml（50 μg/L）与不宁腿综合征有关。
当然一些神经系统疾病的症状也会模拟不宁腿综合征的临床症状，临床上怀疑周围神经病变的患者，有必要进行肌电图和神经传导检查。此外，为了排除其他可能合并RLS的疾病，还应根据情况进行头MRI检查、下肢静脉超声等补充检查。因为不宁腿综合征会合并一些其他类型睡眠疾病如睡眠呼吸暂停或周期性肢体运动，有时还需要完善多导睡眠监测（PSG）。
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