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检验人必备技能:微生物标本常用培养基及接种方法

近日,一个很呆萌可爱的实习生问我:老师,血平板含血,那麦康凯平板含小麦?巧克力平板含巧克力?

小编顿时觉得天雷滚滚,在确认过眼神,同学没在开玩笑后,小编不得不给他进行了以下的科普。

有句话要先说:血平板确实含血,但麦康凯不含小麦,巧克力平板也不含巧克力!!!

本文不仅适用于微生物实习生,也适用于检验科全体同仁。接种微生物标本,是检验人的必备技能。

一、常见培养基及用途

血平板

成分:主要成分包括脱脂羊血、蛋白胨、牛肉粉、氯化钠。

用途:非选择性培养基,本培养基适用于各类细菌的生长,但某些营养要求较高的细菌(如嗜血杆菌),生长并不理想。

部分细菌可呈现溶血现象,关于溶血现象,我们可以将其细分为三种类型:α溶血(草绿色溶血)、β溶血(完全溶血)以及γ溶血(不溶血)。此外,还有一种双环溶血现象。这些溶血特征为我们鉴定细菌提供了有力的依据。

麦康凯平板(MAC)

成分:蛋白胨、胆盐、氯化钠、琼脂、乳糖、结晶紫、中性红等。

用途:弱选择性培养基,适于用于肠道致病菌的分离培养以及非发酵细菌的鉴别。胆盐可以抑制革兰氏阳性菌的生长,对伤寒等沙门菌的生长有促进作用。中性红可以把分解乳糖和不分解乳糖的细菌区分开。

大肠埃希菌,克雷伯菌属可以分解乳糖分别呈桃红色、粉红色菌落。

沙门菌及志贺菌、变形杆菌不分解乳糖,呈无色菌落

小编编了个顺口溜:大肠克雷乳阳红,志沙变形无乳阴(自杀变形无语音)。

巧克力平板(不加抗生素,CA)

成分:蛋白胨、牛肉浸出粉、氯化钠、无菌脱纤维羊血、琼哥伦比亚血琼脂等。

用途:非选择性培养基,与血平板相比,由于培养基中的血液经加热至80-90℃,使红细胞破裂,释放出血红素及辅酶,适合嗜血杆菌、奈瑟菌的生长。

巧克力平板(加抗生素,CAH)

成分:在普通巧克力平板的基础上添加万古霉素。

用途:适用于嗜血杆菌和奈瑟菌属等细菌的分离。

万古霉素具有强大的抗菌能力,能够有效抑制大部分革兰阳性菌的生长。因此,在使用该平板进行细菌培养时,主要观察的是革兰阴性菌的生长情况。同时,通过将血平板与该平板进行比较,有助于我们更好地识别嗜血杆菌和奈瑟菌等微生物。

沙保罗平板(SDA)

成分:蛋白胨、葡萄糖、氯霉素、琼脂等。

用途:用于霉菌、酵母菌、青霉、曲霉等真菌的分离、培养。蛋白胨、葡萄糖提供氮源;氯霉素对革兰阳性、阴性细菌均有抑制作用,有利于真菌的分;琼脂是培养基的凝固剂。

淋球菌平板GC培养基

成分:主要组成成分有特殊蛋白胨、玉米淀粉、氯化钠、磷酸氢二钾、磷酸氢钾、琼脂。

用途:用于淋病奈瑟菌的分离,可抑制杂菌,提高分离率。

SS平板

成分:牛肉浸出粉、蛋白胨、乳糖、胆盐、柠檬酸钠、硫代硫酸钠、柠檬酸铁铵、亮绿、琼脂等。

用途:强选择性培养基,主要用于临床粪便标本中沙门氏菌和志贺氏菌的分离和培养。沙门氏菌和志贺氏菌是导致肠道腹泻的主要病原菌之一。可引起细菌性痢疾和伤寒、副伤寒甲、乙、丙病等,对人类健康危害严重。

志贺氏菌在平皿生成无色、半透明、圆形、微凸、光滑的菌落。

沙门氏菌在平皿生成无色透明或半透明、圆形、光滑、稍隆起菌落,中心呈黑褐色。

大肠埃希菌呈粉红至玫瑰红菌落,部分被抑制

但需注意,变形杆菌、弗劳地柠檬酸杆菌也可在SS培养基上生成黑褐色菌落。

B群链球菌显色平板

成分:主要成分为酵母粉、显色底物和琼脂粉。

用途:通过引入特异性的酶底物,B群链球菌能够分解这些物质并释放出显色原,其色泽淡红色或深红深红色蓝色、绿色、无色为其他类型的细菌。

二、细菌接种方式

三、常见标本的致病菌及选用的培养基及接种要求

参考文献:

[1] WS/T 805—2022临床微生物检验基本技术标准

[2] WS/T 497—2017侵袭性真菌病临床实验室诊断操作指南

[3] 陈东科,主编.实用临床微生物学检验与图谱[M].1版.北京:人民卫生出版社,2011:553

本文为原创文章,属医家小二首发,作者:广东阳春市中医院 检验科 亮亮  韦一滨,感谢作者来稿!为尊重作者版权,未经授权请勿转发。本文观点仅做参考,如对某一观点有争议,可以评论区留言讨论。维护网络环境,请勿发表不当言论。

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